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| SCIENCES DE LA SANTE [ S.S. ] |
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Revue du COSA-CMF |
| Auteurs de l'article |
| THIOUNE N, MBODJ EHB, DIENG L, GUEYE M, TOURE A, BENOIST HM, DE LA CHAPELLE M L. |
| Mots Clés |
| immunocapteur, fluide gingivale, prothèse fixée, anticorps,
DSP surface d’or |
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Num ISSN : 1817-552x [ Trimestriel ] |
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Parution N° 1 du 26-05-2020 |
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Volume : 25 de l'année 2018 |
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| VALIDATION D’UN PROTOCOLE DE FONCTIONNALISATION D’UNE SURFACE
D’OR DANS LA CONCEPTION D’UN NANOCAPTEUR POUR LA DÉTECTION
D’INTERLEUKINES DANS LE FLUIDE GINGIVAL.
EXPERIMENTAL VALIDATION OF PROTOCOL GOLD SURFACE FUNCTIONALIZATION FOR DESIGN
pp. 5-11. |
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| Introduction : Ce travail entre dans le cadre général de l’élaboration
d’un nanobiocapteur destiné à la détection des protéines pro-inflammatoires
(interleukines 1β, IL-4, IL-6, IL-8) dans le fluide gingival après
pose d’une prothèse unitaire fixée. Ces protéines sont des indicateurs
potentiels ou des marqueurs pronostiques ou diagnostiques de la maladie
parodontale au stade infraclinique. Or, pour réaliser une détection
spécifique en milieu complexe (fluide gingival), il est nécessaire de
fonctionnaliser la surface pour améliorer son affinité avec les molécules
cibles et ainsi permettre leur capture sélective à la surface du capteur.
L’objectif de ce travail préliminaire est donc de valider un protocole
de fonctionnalisation des surfaces d’or utilisées dans notre capteur.
Méthodes : Deux stratégies de fonctionnalisation ont été utilisées.
La première consiste à déposer directement les anticorps monoclonaux
sur les surfaces d’or alors que la deuxième stratégie consiste au dépôt
d’anticorps couplé à un agent d’accroche : le DSP (Dithiobis Succinimidyl
Propionate). Ce dernier est une molécule bifonctionnelle souvent utilisée
dans différents protocoles de fonctionnalisation de surface métallique.
Des mesures par Résonance de Plasmons de Surface (SPR) ont été réalisées
ainsi que des mesures de Spectrométrie Raman Exaltée de Surface
(SERS) sur ces surfaces fonctionnalisées pour analyser les couches de
fonctionnalisation de surface pour les deux stratégies.
Résultats : Les mesures par SPR ont permis de démontrer que
pour les deux stratégies, les anti-corps présentent une activité vis-à vis
des antigènes et leur capacité à interagir avec les antigènes reste
intact (pas de perte d’activité suite à leur accroche sur la surface d’or).
Par contre, nous démontrons que l’utilisation de la deuxième stratégie
permet une amélioration de l’affinité des antigènes vis à vis de la
surface fonctionnalisée. De plus, pour la stratégie 2, la concentration
pour atteindre la saturation est plus faible que pour la stratégie 1
indiquant que le nombre d’anticorps immobilisés est moins important
et qu’une monocouche d’anti-corps a été fixée sur la surface d’or. Ce
procédé est donc plus efficace car la sélectivité du capteur est plus
importante. Les mesures SERS ne montrent pas de modification des
bandes spectrales pour les deux stratégies mais une intensité plus
faible pour le spectre de l’anticorps avec DSP.
Conclusion : Le protocole de fonctionnalisation de la surface d’or
par des anticorps couplés au DSP répond plus à nos besoins. Le DSP
a montré son efficacité par la formation d’une monocouche d’anticorps
et ne modifie pas leur signature spectrale. Cette technique semble être
un outil prometteur pour l’évaluation de l’inflammation parodontale
avant et après réalisation de prothèse fixée. |
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